Skip to main content

คราบกรัมคืออะไร?

คราบกรัมหมายถึงผลการทดสอบเชิงบวกหรือเชิงลบที่เกิดขึ้นเมื่อมีการล้างด้วยไอโอดีนกับวัฒนธรรมของแบคทีเรียเพื่อระบุชนิดของมันการทดสอบนี้เรียกว่าการย้อมสีแกรมทำงานโดยการตรวจจับการปรากฏตัวของ lipopolysaccharides (lipoglycans) และ peptidoglycans (mureins) ที่มีอยู่ภายในผนังเซลล์ของตัวอย่างแบคทีเรียแบคทีเรียที่มี peptidoglycans ในระดับสูงกล่าวกันว่าเป็นแกรมบวกในทางตรงกันข้ามระดับที่ต่ำกว่าของ peptidoglycans ที่มี lipopolysaccharides ระบุว่าตัวอย่างเป็นแกรมลบ

ก่อนตัวอย่างแบคทีเรียจะถูกวางไว้บนสไลด์แก้วและให้ความร้อนจนถึงจุดที่ทำให้มันไร้เดียงสาในแง่ของการติดเชื้อถัดไปตัวอย่างแบคทีเรียจะได้รับการรักษาด้วยสารละลาย Gentian Violet-Iodine นานถึงหกสิบวินาทีสไลด์จะถูกล้างเบา ๆ ใต้น้ำสะอาดและใช้สารละลายกรัมซึ่งเป็นส่วนผสมของไอโอดีนและโพแทสเซียมไอโอไดด์เจือจางในน้ำขั้นตอนนี้ทำให้เกิดปฏิกิริยาตอบสนองต่อสารประกอบ Gentian Violet

ในขั้นต้นปฏิกิริยาจะสร้างสีฟ้าเข้มอย่างไรก็ตามการล้างด้วยเอทิลแอลกอฮอล์ที่ตามมาจะนำไปสู่สีในตัวอย่างแบคทีเรียบางตัวอย่างที่จะมีเลือดออก แต่ไม่ใช่ในที่อื่น ๆใช้วิธีแก้ปัญหาสีย้อมสุดท้ายที่ใช้สีที่ตัดกันซึ่งมักจะมีการเปลี่ยนแปลงของสีแดงตัวอย่างที่ยอมรับเคาน์เตอร์นี้จะปรากฏเป็นสีชมพูและถูกกำหนดให้เป็นแกรมลบอย่างไรก็ตามตัวอย่างที่ยังคงรักษาสีฟ้าเข้มคือแกรมบวก

นอกเหนือจากวัตถุประสงค์ในการระบุความสำคัญของการทดสอบคราบกรัมอยู่ในความจริงที่ว่าแบคทีเรียแกรมลบผลิตเอนโดท็อกซินที่มีศักยภาพที่อาจทำให้เกิดโรคร้ายแรงเช่นอหิวาตกโรคและไทฟอยด์แบคทีเรียแกรมลบจำนวนมากยังทนต่อยาปฏิชีวนะและไม่สามารถผลิตวัคซีนจากพวกเขาได้นอกจากนี้แบคทีเรียทั้งหมดไม่ได้ให้ผลลัพธ์ในเชิงบวกหรือเชิงลบในความเป็นจริงบางชนิดถือว่าเป็นแกรมที่ไม่แน่นอนหรือตัวแปรกรัมสปีชีส์อื่น ๆ ไม่ได้รับผลกระทบทั้งหมดจากการทดสอบเพียงเพราะมีชั้นป้องกันขี้ผึ้งในผนังเซลล์ของพวกเขาที่คราบไม่สามารถซึมซับ

การทดสอบคราบกรัมได้รับการพัฒนาในช่วงปลายยุค 1800 โดยนักแบคทีเรียชาวเดนมาร์กชื่อฮันส์คริสเตียนแกรมอย่างไรก็ตามวัตถุประสงค์ดั้งเดิมของการทดสอบคราบกรัมไม่ได้แยกแยะระหว่างสายพันธุ์แบคทีเรียที่แตกต่างกันเลยในความเป็นจริงดร. แกรมเพิ่งกำหนดวิธีที่ดีกว่าในการตรวจจับการปรากฏตัวของแบคทีเรียในตัวอย่างเสมหะที่จัดทำโดยผู้ป่วยโรคปอดบวมนอกจากนี้ยังเป็นที่น่าสนใจที่จะทราบว่าการค้นพบของดร. แกรมในขณะที่ไม่ได้ตั้งใจจะมีผลกระทบอย่างมากต่อการศึกษาแบคทีเรียที่ดื้อต่อยาปฏิชีวนะในอีกครึ่งศตวรรษต่อมา