แอนติบอดีคอนจูเกตคืออะไร?

แอนติบอดี้คอนจูเกตเป็นโมเลกุลที่ติดแท็กที่สามารถใช้ในการตรวจจับแอนติเจนในเนื้อเยื่อวิทยาหรือเอนไซม์เพื่อให้มีการ จำกัด แอนติบอดีที่ถูกผูกไว้มันทำหน้าที่โดยการติดทางร่างกายหรือผันกับแอนติบอดีที่ใช้ในการติดแท็กแอนติเจนที่น่าสนใจแอนติบอดีที่ติดแท็กไปยังแอนติบอดี้คอนจูเกตเป็นเครื่องมือที่มักใช้ในการวิจัยเพื่อระบุตำแหน่งที่แน่นอนหรือปริมาณของโปรตีนหรือแอนติเจนที่น่าสนใจซึ่งแอนติบอดีหรือแอนติบอดีถูกยกขึ้นแอนติบอดีเป็นรีเอเจนต์ในเทคนิคการวิจัยที่สามารถระบุโปรตีนเฉพาะได้โดยการเปิดเผยแอนติเจนหรือโปรตีนที่น่าสนใจไปยังแอนติบอดีที่ถูกยกขึ้นกับมันแอนติเจนหรือโปรตีนสามารถติดแท็กได้โดยใช้แอนติบอดี้คอนจูเกต mdash;นั่นคือแอนติบอดีที่ได้รับการเชื่อมต่อกับโมเลกุลที่ใช้หรือสังเคราะห์โดยเฉพาะเพื่อตรวจพบได้อย่างง่ายดาย mdash;แอนติบอดีในแอนติเจนของตนนั้นสามารถระบุและตรวจสอบได้ชนิดที่พบมากที่สุดของแอนติบอดีคอนจูเกตคือโมเลกุลฟลูออเรสเซนต์ช่วยให้สามารถระบุแอนติเจนในเนื้อเยื่อภายใต้กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนต์คอนจูเกตอื่น ๆ รวมถึงโมเลกุลเช่นหัวไชเท้าเปอร์ออกซิเดสซึ่งใช้ในการผันคำกริยากับแอนติบอดีสำหรับการพัฒนาในภายหลังด้วย diaminobenzidine (DAB)

มักจะถูกยกขึ้นกับแอนติเจนที่เฉพาะเจาะจงในขณะที่แอนติบอดีรองแอนติบอดีปฐมภูมิตัวอย่างเช่นหนึ่งอาจมีความสนใจในการระบุแอนติเจนที่เรียกว่าแอนติเจน X จากนั้นจะใช้ตัวอย่างเช่นแอนติบอดีที่เลี้ยงในเมาส์ที่ทำปฏิกิริยาและติดกับแอนติเจน X เพื่อให้สามารถค้นหาได้และผูกพันกับโมเลกุล X แอนติเจนเหล่านี้แอนติบอดีรองจะถูกใช้ mdash;ตัวอย่างเช่นหนึ่งยกในแพะ mdash;นั่นจะถูกแท็กด้วยคอนจูเกตที่ทำให้แอนติบอดีรองนี้สามารถตรวจพบได้ในการตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์ของเอนไซม์หรือฟลูออเรสเซนต์สำหรับการทดสอบในการแปลแอนติเจนที่ใช้โลคัลโดยใช้กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนอนุภาคทองคำมักจะใช้เป็นแอนติบอดีคอนจูเกตเนื่องจากสามารถตรวจพบได้โดยใช้ลำแสงอิเล็กตรอน

เหตุผลในการใช้แอนติบอดีปฐมภูมิและทุติยภูมิแทนที่จะใช้การผันแอนติบอดี้แอนติบอดีเป็นคอนจูเกตโดยตรงคือประสิทธิผลของต้นทุนการผันแอนติบอดี้มีราคาแพงในแง่ของเวลาและรีเอเจนต์โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับแอนติเจนที่ผิดปกติการผันแอนติบอดีต่อแอนติบอดีปฐมภูมิไม่คุ้มค่ากับค่าใช้จ่ายในการผลิตค่อนข้างโดยการใช้การผันแอนติบอดี้ในแอนติบอดีทุติยภูมิแอนติบอดีคอนจูเกตจำนวนมากสามารถสังเคราะห์ได้ในครั้งเดียวและใช้ในการทดสอบด้วยแอนติบอดีปฐมภูมิที่ปรับแต่งเพื่อ จำกัด แอนติเจนที่แตกต่างกันจำนวนมากทำให้กระบวนการผลิตคุ้มค่าและคุ้มค่าอย่างไรก็ตามในบางกรณีแอนติบอดีปฐมภูมิจะถูกแท็กเพื่อลดเสียงรบกวนในสัญญาณการตรวจจับเนื่องจากการจับแอนติบอดีที่ไม่เฉพาะเจาะจงที่เพิ่มขึ้นซึ่งเป็นผลมาจากการใช้แอนติบอดีหลายตัวในขณะที่การทดสอบที่มีราคาแพงและมีความอ่อนไหวสูงนี้จะยังคงเรียกใช้วิธีนี้เป็นไปได้ที่จะซื้อชุดอุปกรณ์ที่อนุญาตให้นักวิจัยติดแท็กคอนจูเกตกับแอนติบอดีของตัวเองที่เลือกเพิ่มต้นทุนของรีเอเจนต์ แต่ลดขั้นตอนโปรโตคอลและอาจเพิ่มอัตราส่วนสัญญาณต่อสัญญาณรบกวนในการทดสอบการตรวจจับแอนติบอดีครั้งสุดท้าย